Le laboratoire « Maladies Génétiques cutanées : des mécanismes physiopathologiques aux traitements » dirigé par le Pr. Alain Hovnanian recherche un(e) ingénieur d’étude (H/F) pour aider au développement de nouvelles stratégies d’édition du génome (gene editing) au moyen des nucléases CRISPR/Cas9 et la recombinaison homologue, ainsi que base et prime éditeurs dans des cellules souches de l’épiderme pour une maladie génétique cutanée sévère, l’épidermolyse bulleuse dystrophique.
Les missions principales du/de la candidat(e), auxquelles il/elle sera formé(e) si nécessaire, comprendront:
Choix, clonage et manipulation des nucléases de type CRISPR/Cas9, base et prime éditeurs ;
Caractérisation des ARN guides : évaluation de l’activité et la toxicité par la méthode de Surveyor nucléase, TIDE et EditR ;
Recombinaison homologue sur les kératinocytes, fibroblastes primaires et des iPSCs des patients EBDR ;
Mise en culture, maintenance et manipulation des iPSCs ;
Mise en culture des kératinocytes et fibroblastes humains à partir de biopsies cutanées ;
Entretien des lignées et des kératinocytes et fibroblastes humains primaires (passage des cellules, congélation, décongélation, irradiation des fibroblastes 3T3 J2) ;
Production de vecteurs lentiviraux ;
Mise en œuvre et adaptation des techniques de biologie cellulaire et moléculaire (extraction d’ADN, d’ARN, de protéines, PCR, RT-PCR, Taqman-ddPCR, électrophorèse des acides nucléiques et protéiques, clonage, séquençage par la méthode Sanger et haut débit, FACS, immuno-histo(cyto)chimie) ;
Démonstration de la fonctionnalité de l’approche par analyse de xénogreffes de peaux équivalentes corrigées (analyse immuno-histochimique et ultra-structurale de l’épiderme, de la jonction dermo-épidermique, de l’expression du collagène VII et formation des fibres d’ancrage) ;
Réalisation de coupes histologiques en cryostat ;
Utilisation des logiciels associés aux projets.
Esprit d’équipe ;
Capacité d’organisation et de gestion ;
Autonomie ;
Rigueur ;
Motivation et dynamisme ;
Réactivité.
Le poste est à pourvoir dès que possible pour un contrat initial d’un an possiblement renouvelable
Merci d’adresser votre CV, une lettre de motivation, un résumé de vos recherches et les coordonnées d’au moins 2 références
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